為確保產品的性能和無憂的操作，使用前請仔細閱讀本手冊，有任何疑問請咨詢本公司售后技術支持或當地的銷售人員（聯系方式見附錄）。

1.產品介紹

Epoxy Focurose 4FF是經過Epoxy活化的快流速純化介質，適用于偶聯等含有羥基、氨基和巰基的生化小分子。在生物醫(yī)藥純化工藝中經過反復的驗證，得到了廣泛的應用。

特點：

a.應用廣泛，可適用于偶聯含羥基、氨基或巰基的生物分子。

b.偶聯簡單、靈活、快速、有效，能高效的維持生物分子的生物學活性及穩(wěn)定性。

c.流速快、產率高、易于放大。

表1：介質性能參數

*：穩(wěn)定性取決于偶聯的配基

2.溶液制備

A液：0.1M Na2CO3、0.5M NaCl，pH 10.5。

B液：1.0M 乙醇胺，pH 8.0。

C液：0.1M Tris-HCl、0.5M NaCl，pH 8.5。

D液：0.1M 乙酸鈉、0.5M NaCl，pH 4.0。

E液：20%乙醇。

F液：0.02M Na2HPO4、0.5M NaCl， pH 7.0-7.4。

G液：0.1M Glycine-HCl，pH 2.7。

H液：1.0M Tris-HCl，pH 9.0。

3.樣品制備

3.1按200 umol/ml的濃度將待偶聯樣品溶解在A液中，也可以采用透析/超濾/G25將待偶聯樣品置換到A液中。

3.2樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用   0.8μm過濾）。

4.偶聯流程

4.1取所需量的介質勻漿液至相應規(guī)格的砂芯漏斗中抽干。

4.2加入2倍介質體積的純化水，攪拌均勻后抽干；重復2次。

4.3將介質轉移到相應規(guī)格的反應器中。

4.4將待偶聯樣品加入到反應器中，室溫條件下溫和攪拌約16h。

4.5將介質轉移到砂芯漏斗中抽干，保存收集容器中偶聯后的溶液。

4.6將介質用5倍B液重懸，室溫條件溫和攪拌4-16h，抽干。用2倍體積的純凈水清洗，再次抽干。清洗步驟重復兩次

4.7加入2倍介質體積的C液，攪拌均勻后抽干；重復2次。

4.8將介質轉移到相應規(guī)格的反應器中, 加入2倍介質體積的C液, 室溫條件下溫和攪拌約2h。

4.9將介質轉移到砂芯漏斗中抽干。

4.10加入2倍介質體積的D液, 攪拌均勻后抽干。

4.11重復“4.9-4.10”2次。

4.12加入2倍介質體積的E液, 攪拌均勻后抽干；重復2次。

4.13將介質轉移到相應規(guī)格的容器中，加入等體積的E液后保存?zhèn)溆谩?/span>

5.偶聯效率測定

5.1測定偶聯前后溶液中樣品含量（A280或其它含量測定方法），計算偶聯效率。

6.純化流程（以XK16/10為例）

6.1采用液滴對液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

6.2用純化水以5ml/min的流速沖洗5個CV。

6.3用F液以5ml/min的流速沖洗10個CV。

6.4將樣品以5ml/min的流速上樣。

6.5用F液以5ml/min的流速沖洗至紫外吸收值平穩(wěn)（10-15個CV）。

6.6用G液以5ml/min的流速洗脫10CV。

6.7用純化水以5ml/min的流速沖洗5個CV。

6.8用E液以5ml/min的流速沖洗5個CV。

7.清洗（取決于待偶聯樣品的穩(wěn)定性）

7.1用6M鹽酸胍沖洗10CV，立即用純化水沖洗10CV。

7.2用70%乙醇沖洗10CV，立即用純化水沖洗10CV。

7.3用F液沖洗10CV。

8.常見問題

表2：常見問題及解決方案

9.訂購信息

表3：訂購信息表

備注：大規(guī)格包裝產品或其它產品購買，請咨詢本公司當地銷售或售前技術支持。