為確保產品的性能和無憂的操作，使用前請仔細閱讀本手冊，有任何疑問請咨詢本公司售后技術支持或當地的銷售人員（聯系方式見附錄）。

1.產品介紹

Focurose 6FF適用于生物大分子物質的組分分離和中度純化（去除小分子雜質），例如：病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋DNA、多糖及大分子復合物。

特點：

a.高（理化）穩(wěn)定性、高流速（組分分離）、高回收率（可高達95%）。

b.溫和的洗脫條件可以完整的保留生物大分子生物學活性和功能。

c.易于放大。

d.易于維護。

表1：性能參數

2.溶液制備

洗脫液：根據客戶需求進行配制。

備注：建議在目標溶液中加入一定濃度的鹽（至少0.025 M）用來抑制樣本和介質的離子作用。

3.樣品制備

3.1濃縮樣品上樣前過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用   0.8μm過濾）。

4.純化流程（以裝填XK 16/70的柱子為例 ）

4.1清洗

取140g的沉降介質，加入3倍體積的純化水重懸后用G3砂芯漏斗抽干，重復此步驟兩次。

4.2勻漿

將清洗完的抽干的介質用相同體積(≈140ml)的純化水進行重懸，用玻璃棒緩慢攪拌均勻。

4.3準備柱子

a.將柱管、下柱頭、適配器以及裝柱器用純化水沖洗干凈；

b.安裝下柱頭后擰緊密封圈；

c.注入3-5cm高的純化水；

d.擰下下堵頭，待排出所有氣泡后再擰上下堵頭；

e.安裝裝柱器，將層析柱垂直固定在層析系統(tǒng)附近。

4.4脫氣

   將勻漿后的介質用真空泵或超聲清洗裝置進行脫氣。

4.5裝柱

a. 將脫氣后的介質用玻璃棒或其它攪拌裝置溫和攪拌均勻后，快速、連續(xù)加入（用玻璃棒引流，避免引入氣       泡）到層析柱中。

b. 快速用純化水將裝柱器上端填滿，并裝上裝柱器蓋。

c. 用管路連接層析系統(tǒng)和裝柱器后，擰下下堵頭，以3ml/min(90cm/h)的流速壓柱120min后暫停層析系統(tǒng)。

d. 擰上下堵頭，快速取下裝柱器，用純化水填滿柱管。

e. 將適配器連接層析系統(tǒng)，待管路中氣泡排盡后，將適配器稍微傾斜后插入柱管至介質界面上端0.5-1cm，擰緊密封圈。

f. 擰下下堵頭，以6ml/min(180cm/h)的流速壓柱30min后停止層析系統(tǒng)。

g. 標記介質界面刻度，將適配器壓至介質界面以下0.3cm。

4.6柱效檢測

a. 連接層析柱出口至層析系統(tǒng)，用純化水以1ml/min(30cm/h)的流速平衡2CV(柱體積)；

b. 用定量環(huán)或上樣泵注入1%CV的2%丙酮；

c. 以1ml/min(30cm/h)的流速運行1.5CV；

d. 計算HETP和As，HETP≤3h（h為平均粒徑）且0.7≤As≤1.3方為合格，否則重裝。

4.7使用

      若柱效檢測合格可立即使用，以1ml/min(30cm/min)的流速用平衡液（平衡液中加入0.15M氯化鈉，抑制可能存在的非特異性吸附）平衡2CV后進行進樣（建議上樣體積≤2.5%CV）分離；若柱效檢測合格后，以1ml/min(30cm/min)的流速用保存液平衡2CV后保存。

5.清洗（以裝填XK 16/70的柱子為例 ）

5.1 用純化水以1ml/min（30cm/h）沖洗2個CV。

5.2  用1.0M NaOH以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

5.3 用純化水以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

5.4 用1.0M 乙酸以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。。

5.5 用純化水以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

5.6 用70%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

5.7 用純化水以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

5.8 用20%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

6.消毒

6.1 用純化水以1ml/min（30cm/h）沖洗2個CV。

6.2 用1.0M NaOH以1ml/min（30cm/h）的流速反向沖洗2個CV。

6.3 用純化水以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

6.4 用20%乙醇以1ml/min（30cm/h）的流速沖洗2個CV。

7.常見問題

表2：常見問題及解決方案

8.訂購信息

表3：訂購信息表

備注：大規(guī)格包裝產品或其它產品購買，請咨詢本公司當地銷售或售前技術支持。