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產(chǎn)品展示

PS Focurose HPL

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HQ220325001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

  為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術支持或當?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

PS Focurose HPL是一種特定的親和填料,適用于部分病毒、病毒樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白(見表2)的分離純化。

特點:

a.快速、簡單(一步純化)。

b.載量高。

c.易于放大。

表1:性能參數(shù)

介質(zhì)

PS Focurose HPL

基質(zhì)

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

90±5μm

溶菌酶載量

≥3mg/ml介質(zhì)

pH穩(wěn)定性

5-12(長期) 5-12(短期)

操作壓力

≤0.3MPa

流速

≧300cm/h

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

表2:PS Focurose HPL適用性

Viruses

Viral/Microbial Agents

Rabies

Influenza

Japanese Enchephalitis

Feline Leukemia

Feline Herpes

Feline Calicivirus

Respiratory Syncytial Virus

Human Herpes Simplex

Human Measles

Human Parainfluenza

Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits

Hepatitis B Surface Antigen

Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis

Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin

 

2.溶液配制

平衡液:0.01M PB,調(diào)節(jié)pH 7.2,4-8℃保存。

洗脫液:0.01M PB、1.0M NaCl,調(diào)節(jié)pH 7.2,室溫保存。

備注:平衡液pH為7.2±0.2,在平衡液中可經(jīng)添加0.1M NaCl抑制少量雜質(zhì)的吸附,取決樣品特性;洗脫時可以把NaCl可增加到2M來提高洗脫能力。

 

3.樣品的制備

a.樣品所在溶液鹽的組分及pH必須和平衡液保持一致,可以通過用平衡液稀釋或透析、超濾、G25進行緩沖液置換處理。

b.樣品過濾(粒徑≤45μm用0.22μm過濾、粒徑≤165μm用0.45μm過濾、粒徑≤300μm用0.8μm過濾,避免堵塞離子交換介質(zhì))。

備注:不建議直接用強酸或強堿調(diào)整樣品溶液的pH,可能會出現(xiàn)目標物的降解和失活。

 

4.純化流程(以XK16/10為例)

4.1用純化水以5ml/min沖洗5CV。

4.2用平衡液以5ml/min沖洗10CV。

4.3將樣品以2.5ml/min上樣,上樣完成后用平衡液進行清洗直至基線平穩(wěn)。

4.4用洗脫液以5ml/min洗脫10CV,并收集洗脫液。

4.5用純化水以5ml/min沖洗5CV。

4.6用保存液以5ml/min沖洗后保存。

 

5.清洗(以XK16/10為例)

清洗后可以去除一些強結合性物質(zhì)(例如一些強結合的蛋白、變性蛋白、脂類等),從而達到恢復介質(zhì)的優(yōu)良性能(例如載量、流動性、柱效等)。

建議每使用5-10次后進行一次清洗,具體清洗頻率需根據(jù)純化的初始樣品的潔凈度進行調(diào)整。

5.1用3M NaCl以1ml/min的流速沖洗10CV。

5.2用0.1M NaOH以1ml/min的流速沖洗20CV。

5.3用3M NaCl以1ml/min的流速沖洗10CV。

5.4用純化水以5ml/min的流速沖洗10CV。

5.5用保存液以5ml/min的流速沖洗5CV。

 

6.常見問題

表3:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方案

純化時目標物不與介質(zhì)結合

或結合量較低

1.上樣量過載

降低上樣量

2.上樣流速過快

降低上樣流速

3.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集

及時有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì)

4.目標物不帶電或與介質(zhì)帶同樣的電荷

篩選合適的結合緩沖液

5.樣本或平衡液中鹽濃度和pH不正確

檢查樣品和平衡液中的電導和pH

6.選用了錯誤的緩沖液

參考緩沖液選擇表

7.樣品中加入了不合適的去污劑

檢查樣品中是否有不合適的去污劑

洗脫時沒有收集到目標物

或只收集到少量目標物

1.目標物沒有與介質(zhì)結合或結合量較少

先確認目標物是否與介質(zhì)結合

2.洗脫條件不合適

洗脫液洗脫能力不夠,加大鹽濃度和調(diào)整洗脫液pH

3.洗脫時間不夠

降低流速,延長洗脫液的保留時間

4.洗脫體積過小

加大洗脫體積

5.目標物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀

檢測目標物在洗脫液條件(鹽濃度和pH)下的溶解度和穩(wěn)定性。

目標物純度較低

 

1.樣品沒有經(jīng)過前處理

樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾

2.樣品粘度過高

用平衡液適當?shù)南♂寴悠?,降低粘度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀

及時有效地清洗介質(zhì)

5.洗脫條件不佳

優(yōu)化洗脫條件

6.目標物出現(xiàn)降解

檢測目標物的穩(wěn)定性

7.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購買

8.分離柱頂部有較大儲樣體積

重新裝柱或降低儲樣體積

9.介質(zhì)中有微生物生長

介質(zhì)使用完后,請及時正確保存介質(zhì)

介質(zhì)載量下降

1.上樣流速過快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集,導致載量下降。

及時清洗介質(zhì)

3.使用次數(shù)過多,配基被氧化或脫落

及時清洗介質(zhì)或更換新介質(zhì)

色譜峰上升過陡

介質(zhì)裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質(zhì)或濾膜

2.蛋白沉淀在介質(zhì)中

調(diào)整平衡液和洗脫液組分,以維持目標物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結合效率

3.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過濾

 

7.訂購信息

表4:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

PS Focurose HPL

25ml

HQ220325025M

PS Focurose HPL

100ml

HQ220325100M

PS Focurose HPL

500ml

HQ220325500M

PS Focurose HPL

1L

HQ220325001L

PS Focurose HPL

5L

HQ220325005L

PS Focurose HPL

20L

HQ220325020L

備注:大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買,請咨詢本公司當?shù)劁N售或售前技術支持。


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PS Focurose HPL

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