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Plasmid Focurose HF

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產 地:中國

貨 號:HQ190320001L

品 牌:匯研生物


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產品概述

   為確保產品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術支持或當?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產品介紹

Plasmid Focurose HF純化原理是利用配基的嗜硫吸附,適用于分離純化閉環(huán)的超螺旋質粒DNA。

特點:

a.快速、簡單(一步純化)。

b.載量高、流速快、易于放大。

 

表1:介質性能參數(shù)

基質

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

≈90μm

結合載量1

≥2mg(pDNA)/ml(介質)

pH穩(wěn)定性

3-11(長期)

2-13(短期)

化學穩(wěn)定性

所有常用緩沖溶液中穩(wěn)定

30%異丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.5M NaOH

流速

≥700cm/h

操作壓力

≤0.5MPa

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-8℃

 

2.溶液制備

平衡液:2.1M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

洗脫液:0.3M NaCl、1.7M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

 

3.樣品制備

3.1樣品是經過Focurose FF初步純化的收集組分。

3.2樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4.純化流程(以XK16/10為例)

4.1采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

4.2用純化水以4ml/min的流速沖洗10個CV。

4.3用平衡液以4ml/min的流速沖洗5個CV。

4.4將樣品以4ml/min的流速上樣。

4.5用平衡液以4ml/min的流速沖洗5個CV。

4.6用洗脫液以2.5ml/min的流速沖洗5個CV。

4.7用純化水以4ml/min的流速沖洗10個CV。

4.8用保存液以4ml/min的流速沖洗5個CV。

 

5.清洗(以XK16/10為例)

5.1用純化水以4ml/min的流速沖洗5個CV。

5.2用0.5M NaOH以1ml/min的流速沖洗5個CV。

5.3用純化水以4ml/min的流速沖洗10個CV。

5.4用平衡液以4ml/min的流速沖洗5個CV。

5.5用純化水以4ml/min的流速沖洗5個CV。

5.6用保存液以4ml/min的流速沖洗5個CV。

 

6.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方案

純化時目標物不與介質結合

或結合量較低

1.上樣量過載

降低上樣量

2.上樣流速過快

降低上樣流速

3.目標物和介質結合力弱

增加平衡液中(NH4)2SO4濃度

洗脫時沒有收集到目標物

或只收集到少量目標物

1.目標物沒有與介質結合或結合量較少

先確認目標物是否與介質結合

2.洗脫時間不夠

降低流速,延長洗脫液的保留時間

3.洗脫體積過小

加大洗脫體積

目標物純度較低

 

1.樣品沒有經過前處理

上柱前必須要經過過濾

2.樣品粘度過高

用平衡液適當?shù)南♂寴悠?,降低樣品粘度和濃度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質蛋白或脂類在介質中聚集沉淀

及時有效地清洗介質

5.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購買

6.分離柱頂部有較大儲樣體積

重新裝柱或降低儲樣體積

7.介質中有微生物生長

介質使用完后,請及時正確保存介質

介質載量下降

1.上樣流速過快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質中聚集,導致載量下降

及時清洗介質

3.使用次數(shù)過多,配基逐漸脫落

更換新介質

色譜峰上升過陡

介質裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質或濾膜

2.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經過過濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過濾

 

7.訂購信息

表3:訂購信息表

產品

規(guī)格

貨號

Plasmid Focurose HF

25ml

HQ190320025M

Plasmid Focurose HF

100ml

HQ190320100M

Plasmid Focurose HF

500ml

HQ190320500M

Plasmid Focurose HF

1L

HQ190320001L

Plasmid Focurose HF

5L

HQ190320005L

Plasmid Focurose HF

20L

HQ190320020L

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Plasmid Focurose HF

Plasmid Focurose HF

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Plasmid Focurose HF

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