價 格：詢價
規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L
產(chǎn) 地：中國
貨 號：HQ060321001L
品 牌：匯研生物
為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作，使用前請仔細閱讀本手冊，有任何疑問請咨詢本公司售后技術(shù)支持或當?shù)氐匿N售人員（聯(lián)系方式見附錄）。
1.產(chǎn)品介紹
Heparin Focurose FF適用于各種酶類的分離純化，包括抗凝血酶Ⅲ、類凝血酶、人凝血因子Ⅸ/Ⅺ/Ⅷ、脂蛋白脂肪酶、膠原酶、DNA聚合酶等；也有和人白介素、人前列腺生長因子、重組人血管內(nèi)皮生長因子、軟骨生長因子、堿性成纖維細胞生長因子、重組人酸性成纖維細胞生長因子、重組肝細胞生長因子、重組鼠肝素輔因子Ⅱ、重組人血小板第四因子、重組人內(nèi)皮抑素、重組人角質(zhì)細胞生長因子等生物大分子。
特點
a.快速、簡單（一步純化）。
b.流動性好。
c.易于放大。
表1：性能參數(shù)
基質(zhì) | 高度交聯(lián)6%的瓊脂糖 |
粒徑范圍 | 45-165μm |
平均粒徑 | 90±5μm |
配基 | 肝素鈉 |
配基密度 | ≧2mg/ml(介質(zhì)) |
pH穩(wěn)定性 | 4-13（短期） 4-12（長期） |
化學穩(wěn)定性 | 所有常用緩沖溶液、0.1M NaOH、0.05M乙酸鈉（pH 4.0）、8M尿素、6M鹽酸胍 |
流速 | ≧300cm/h |
操作壓力 | ≤0.3MPa |
貯存溶液 | 0.05M NaAc，20%乙醇 |
貯存溫度 | 4-30℃ |
2.溶液配制
平衡液：0.01M PB，pH ～7.0。
洗脫液：0.01M PB、2.0 M NaCl，pH ～7.0
3.樣品制備
3.1樣品所在溶液要和平衡液保持一致，可以用平衡液進行裂解、透析/超濾/G25進行緩沖液置換。
3.2樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用 0.8μm過濾）。
4.純化流程（以XK16/10為例）
4.1采用液滴對液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。
4.2用純化水以5ml/min沖洗10CV。
4.3用平衡液以5ml/min沖洗10CV。
4.4將樣品以1.0ml/min上樣，上樣完成后用平衡液進行清洗直至基線平穩(wěn)。
4.5用洗脫液以5ml/min洗脫10CV，并收集洗脫液。
4.6用純化水以5ml/min沖洗5CV。
4.7用保存液以5ml/min沖洗后保存
5.放大
保持柱床高度不變
5.2 保持線性流速不變
備注：若實際情況和實驗室數(shù)據(jù)有偏差，可以維持停留時間不變。
6.清洗
清洗后可以去除一些強結(jié)合性物質(zhì)（例如一些強結(jié)合的蛋白、變性物質(zhì)、沉淀等），從而達到恢復介質(zhì)的優(yōu)良性能（例如載量、流動性、柱效等）。
建議每使用5次后進行一次清洗，具體清洗頻率需根據(jù)純化的初始樣品的潔凈度進行調(diào)整。
a.用2.0 M NaCl沖洗5CV，用純化水沖洗10CV。
b.用1.0% Triton X-100沖洗5CV，用純化水沖洗10CV。
c.用0.1M NaOH或6M鹽酸胍沖洗5CV，用純化水沖洗10CV。
d.用20%乙醇沖洗5CV后保存。
7.常見問題
表2：常見問題及解決方案
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
純化時目標物不與介質(zhì)結(jié)合 或結(jié)合量較低 | 1.上樣量過載 | 降低上樣量 |
2.上樣流速過快 | 降低上樣流速 | |
3.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集 | 及時有效地清洗介質(zhì)或更換新的介質(zhì) | |
4.樣本或平衡液中pH不在正確的范圍 | 保證樣本和平衡液pH一致 | |
洗脫時沒有收集到目標物 或只收集到少量目標物 | 1.目標物沒有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少 | 先確認目標物是否與介質(zhì)結(jié)合 |
2.洗脫條件不合適 | 更換洗脫液 | |
3.洗脫時間不夠 | 降低流速，延長洗脫液的保留時間 | |
4.洗脫體積過小 | 加大洗脫體積 | |
5.目標物在洗脫液條件下出現(xiàn)聚集沉淀 | 檢測目標物在洗脫液條件（pH）下的溶解度和穩(wěn)定性。 | |
目標物純度較低
| 1.樣品沒有經(jīng)過前處理 | 樣品上柱前必須要經(jīng)過離心或過濾 |
2.樣品粘度過高 | 用平衡液適當?shù)南♂寴悠罚档驼扯取?/span> | |
3.洗雜不徹底 | 加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致 | |
4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀 | 及時有效地清洗介質(zhì) | |
5.洗脫條件不佳，洗脫流速太快、梯度太陡。 | 優(yōu)化洗脫條件 | |
6.目標物出現(xiàn)降解 | 檢測目標物的穩(wěn)定性 | |
7.柱料裝填效果不佳 | 重新裝填或購買 | |
8.雜質(zhì)出現(xiàn)非特異性吸附 | 適當選擇添加劑降低非特異性吸附 | |
9.分離柱頂部有較大儲樣體積 | 重新裝柱或降低儲樣體積 | |
10.介質(zhì)中有微生物生長 | 介質(zhì)使用完后，請及時正確保存介質(zhì) | |
介質(zhì)載量下降 | 1.上樣流速過快 | 降低上樣流速 |
2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集，導致載量下降。 | 及時清洗介質(zhì) | |
3.使用次數(shù)過多，配基被氧化或脫落 | 及時清洗介質(zhì)或更換新介質(zhì) | |
色譜峰上升過陡 | 介質(zhì)裝填過緊 | 重新裝柱 |
色譜峰上升過緩或拖尾 | 介質(zhì)裝填太松 | 重新裝柱 |
柱床有裂縫或干涸 | 出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入 | 檢查管路是否有泄露或氣泡，重新裝柱 |
液流較慢 | 1.蛋白或脂類聚集 | 及時清洗介質(zhì)或濾膜 |
2.蛋白沉淀在介質(zhì)中 | 調(diào)整平衡液和洗脫液組分，以維持目標物的穩(wěn)定性和介質(zhì)的結(jié)合效率 | |
3.分離柱中微生物生長 | 所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣； 樣品上柱前必須離心或過濾 |
8.訂購信息
表3：訂購信息表
產(chǎn)品 | 規(guī)格 | 貨號 |
Heparin Focurose FF | 25ml | HQ060321025M |
Heparin Focurose FF | 100ml | HQ060321100M |
Heparin Focurose FF | 500ml | HQ060321500M |
Heparin Focurose FF | 1L | HQ060321001L |
Heparin Focurose FF | 5L | HQ060321005L |
Heparin Focurose FF | 20L | HQ060321020L |
備注：大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買，請咨詢本公司當?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。
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