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產(chǎn)品展示

IgY Focurose HP

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HQ060219001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細(xì)閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

IgY Focurose 6HP純化原理是利用電子供體和電子受體之間的相互作用(高鹽加強(qiáng)、低鹽減弱)來分離純化生物分子,可以快速、簡單從蛋黃中純化IgY。

特點:

a.快速、簡單(一步純化)。

b.載量高、流速快、易于放大。

 

表1:介質(zhì)性能參數(shù)

基質(zhì)

高度交聯(lián)6%的瓊脂糖

粒徑范圍

25-45um

平均粒徑

35±5um

結(jié)合載量

20mg(IgG)/ml(介質(zhì))

pH穩(wěn)定性

3-11(長期)

2-13(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

所有常用緩沖溶液中穩(wěn)定

30%異丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.5M NaOH

流速

≥150cm/h

操作壓力

≤0.3MPa

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-8℃

備注:每個雞蛋中約400mg IgY。

 

2.溶液制備

平衡液:0.02M PB、0.5M K2SO4,pH 7.5。

洗脫液:0.02M PB,pH 7.5。

再生液:0.02M PB、30%異丙醇,pH 7.5。

備注:當(dāng)結(jié)合效果不佳時,可以將平衡液中K2SO4更換為0.6-0.8M Na2SO4。

 

3.樣品制備

3.1將蛋黃從蛋清中充分的分離出來,加入九倍體積的純化水,在4℃溫和的攪拌6小時。

3.2高速離心(4℃,11500rpm)30min,取上清后按量加入K2SO4至濃度為0.5M,調(diào)節(jié)pH至7.5。

3.3樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4.純化流程(以XK16/10為例)

4.1采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

4.3用純化水以5ml/min的流速沖洗5個CV。

4.4用平衡液以5ml/min的流速沖洗5個CV。

4.5用再生液以5ml/min的流速沖洗5個CV。

4.6用平衡液以5ml/min的流速沖洗5個CV。

4.6將樣品以5ml/min的流速上樣。

4.7用平衡液以5ml/min的流速沖洗至紫外吸收值平穩(wěn)(15個CV)。

4.8用洗脫液以5ml/min的流速沖洗至紫外吸收值平穩(wěn)(15個CV)。

4.9用再生液以5ml/min的流速沖洗10個CV。

4.10用純化水以5ml/min的流速沖洗10個CV。

4.11用保存液以5ml/min的流速沖洗5個CV。


5.常見問題

表2:常見問題及解決方案

問題

可能原因

解決方案

純化時目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合

或結(jié)合量較低

1.上樣量過載

降低上樣量

2.上樣流速過快

降低上樣流速

3.目標(biāo)物和介質(zhì)結(jié)合力弱

增加平衡液中(NH4)2SO4濃度

洗脫時沒有收集到目標(biāo)物

或只收集到少量目標(biāo)物

1.目標(biāo)物沒有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少

先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合

2.洗脫時間不夠

降低流速,延長洗脫液的保留時間

3.洗脫體積過小

加大洗脫體積

目標(biāo)物純度較低

 

1.樣品沒有經(jīng)過前處理

上柱前必須要經(jīng)過過濾

2.樣品粘度過高

用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?,降低樣品粘度和濃度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀

及時有效地清洗介質(zhì)

5.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購買

6.分離柱頂部有較大儲樣體積

重新裝柱或降低儲樣體積

7.介質(zhì)中有微生物生長

介質(zhì)使用完后,請及時正確保存介質(zhì)

介質(zhì)載量下降

1.上樣流速過快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集,導(dǎo)致載量下降

及時清洗介質(zhì)

3.使用次數(shù)過多,配基逐漸脫落

更換新介質(zhì)

色譜峰上升過陡

介質(zhì)裝填過緊

重新裝柱

色譜峰上升過緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時清洗介質(zhì)或濾膜

2.分離柱中微生物生長

所用試劑必須經(jīng)過過濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過濾

 

6.訂購信息

表3:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

IgY Focurose HP

25ml

HQ060219025M

IgY Focurose HP

100ml

HQ060219100M

IgY Focurose HP

500ml

HQ060219500M

IgY Focurose HP

1L

HQ060219001L

IgY Focurose HP

5L

HQ060219005L

IgY Focurose HP

20L

HQ060219020L

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IgY Focurose HP

IgY Focurose HP

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IgY Focurose HP

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