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產(chǎn)品展示

DEAE Focurose HP

價 格:詢價

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HL060207001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

  為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員。

DEAE Focurose HP是弱陰離子交換介質(zhì),適用于蛋白、多肽、核酸等所有帶電的生物分子的分離純化。小顆粒設(shè)計,多應(yīng)用樣品的精細純化。


1 產(chǎn)品介紹

特點:

a.容易放大。

b.高分辨率。

c.高化學(xué)耐受性。

d.便于維護。

 

表1:DEAE Focurose HP 性能參數(shù)

基質(zhì)

6%高度交聯(lián)的瓊脂糖

粒徑范圍

25-45μm

平均粒徑

35±5μm

介質(zhì)類型

弱陰離子交換

帶電基團

N+(C2H5)2H

離子載量

0.09-0.13mmol Cl-/ml介質(zhì)

操作壓力

≤0.3MPa

流速

≥150cm/h

pH穩(wěn)定性

2-9(工作)/2-12(長期)/ 2-14(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

常用緩沖液、1.0M氫氧化鈉、8M 尿素、6M 鹽酸胍、70%乙醇

避免使用

氧化劑、陰離子型去污劑、陰離子型緩沖液

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖1:離子交換介質(zhì)的選擇

說明:

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點時,選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點時,選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2:陰離子交換緩沖液

pH范圍

緩沖鹽

濃度(mM)

平衡離子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl-

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl-或HCOO-

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl-

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl-

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl-

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl-或CH3COO-

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl-

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl-或CH3COO-

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl-

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl-

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl-

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl-

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl-

11.12


表3:陽離子交換緩沖液

pH范圍

緩沖鹽

濃度(mM)

平衡離子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Na+

8.33

 

說明:

a.按照表2和表3選擇緩沖溶液的種類和濃度。

b.錯誤的緩沖液(種類和濃度)會干擾分離效果(如分離度、載量、pH波動等)。

c.所使用緩沖液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍內(nèi)。

d.使用分析純或者更高純度的緩沖液。

e.在溶液配制后,須經(jīng)過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用0.8μm過濾)和脫氣處理(超聲或負壓)。

 

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進行緩沖液置換。

樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4 純化流程(以XK16/10為例)

采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以3ml/min的流速沖洗5CV(CV指柱床體積,下同)。

用洗脫液以3ml/min的流速沖洗5CV。

用平衡液以3ml/min的流速沖洗10CV。

將樣品以3ml/min的流速上樣。

用平衡液以3ml/min的流速沖洗10CV。

用洗脫液以3ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實驗數(shù)據(jù),采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以3ml/min的流速沖洗5CV。

備注:再生液=平衡液+1M NaCl,其它組分不變。


5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注:若實際情況和實驗室數(shù)據(jù)有偏差,可以維持停留時間不變。

 

6 維護

6.1平衡

柱子裝填完成后,用平衡液以60cm/h的流速沖洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后,用再生液以60cm/h的流速沖洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì),例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強疏水蛋白。

用1.0M NaOH,30%異丙醇以30cm/h的流速反向沖洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在20%乙醇中4-30℃保存。

 

7 訂購信息

表4:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

DEAE Focurose HP

25ml

HL060207025M

DEAE Focurose HP

100ml

HL060207100M

DEAE Focurose HP

500ml

HL060207500M

DEAE Focurose HP

1L

HL060207001L

DEAE Focurose HP

5L

HL060207005L

DEAE Focurose HP

20L

HL060207020L


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DEAE Focurose HP

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