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產(chǎn)品展示

SP Focurose HP

價(jià) 格:詢價(jià)

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號:HL060201001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

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SP Focurose HP是強(qiáng)陽離子交換介質(zhì),適用于蛋白、多肽、核酸等所有帶電的生物分子的分離純化。小顆粒設(shè)計(jì),多應(yīng)用樣品的精細(xì)純化。


1 產(chǎn)品介紹

特點(diǎn):

a.容易放大。

b.高分辨率。

c.高化學(xué)耐受性。

d.便于維護(hù)。


表1:SP Focurose HP 性能參數(shù)

基質(zhì)

6%高度交聯(lián)的瓊脂糖

粒徑范圍

25-45μm

平均粒徑

35±5μm

介質(zhì)類型

強(qiáng)陽離子交換

帶電基團(tuán)

-SO3-

離子載量

0.15-0.20mmol H+/ml介質(zhì)

操作壓力

≤0.3MPa

流速

≥150cm/h

pH穩(wěn)定性

4-12(工作)/4-13(長期)/ 3-14(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

常用緩沖液、1.0M氫氧化鈉、8M 尿素、6M 鹽酸胍、70%乙醇

避免使用

氧化劑、陽離子型去污劑、陽離子型緩沖液

貯存溶液

0.2M NaAc,20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

2 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖1:離子交換介質(zhì)的選擇

說明:

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí),選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí),選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2:陰離子交換緩沖液

pH范圍

緩沖鹽

濃度(mM)

平衡離子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl-

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl-或HCOO-

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl-

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl-

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl-

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl-或CH3COO-

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl-

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl-或CH3COO-

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl-

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl-

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl-

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl-

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl-

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl-

11.12


表3:陽離子交換緩沖液

pH范圍

緩沖鹽

濃度(mM)

平衡離子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Na+

8.33

 

說明:

a.按照表2和表3選擇緩沖溶液的種類和濃度。

b.錯(cuò)誤的緩沖液(種類和濃度)會(huì)干擾分離效果(如分離度、載量、pH波動(dòng)等)。

c.所使用緩沖液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍內(nèi)。

d.使用分析純或者更高純度的緩沖液。

e.在溶液配制后,須經(jīng)過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用0.8μm過濾)和脫氣處理(超聲或負(fù)壓)。

 

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。


4 純化流程(以XK16/10為例)

采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以3ml/min的流速?zèng)_洗5CV(CV指柱床體積,下同)。

用洗脫液以3ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

用平衡液以3ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

將樣品以3ml/min的流速上樣。

用平衡液以3ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

用洗脫液以3ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以3ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

備注:再生液=平衡液+1M NaCl,其它組分不變。

 

5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注:若實(shí)際情況和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)有偏差,可以維持停留時(shí)間不變。

 

6 維護(hù)

6.1平衡

柱子裝填完成后,用平衡液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后,用再生液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì),例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強(qiáng)離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強(qiáng)疏水蛋白。

以30cm/h速度,先用純化水和70%乙醇或30%異丙醇進(jìn)行梯度沖洗(5個(gè)柱床體積),再用70%乙醇或30%異丙醇沖洗5個(gè)柱床體積,最后用70%乙醇或30%異丙醇和純化水進(jìn)行梯度沖洗5個(gè)柱床體積。

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進(jìn)行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在0.2M NaAc 、20%乙醇中4-30℃保存。

 

7 訂購信息

表4:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號

SP Focurose HP

25ml

HL060201025M

SP Focurose HP

100ml

HL060201100M

SP Focurose HP

500ml

HL060201500M

SP Focurose HP

1L

HL060201001L

SP Focurose HP

5L

HL060201005L

SP Focurose HP

20L

HL060201020L

備注:大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購買,請咨詢本公司當(dāng)?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。


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SP Focurose HP

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